【摘要】试验研究了中草药薰香(天香)燃烟对5种猪场常见细菌(金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌)抑菌率的影响。结果表明,直接用薰香燃烟熏10~30 min后都可以达到很好的熏灭效果,尤其对嗜水气单胞菌、大肠杆菌、链球菌的熏灭效果最佳。
规模化养殖场常年不断发生细菌病,细菌的混合感染或者继发性感染是导致猪群的发病率和死亡率增高的重要原因。细菌病的传播多为通过空气传播,杀灭空气和栏舍表面的细菌可有效防治猪病。中药熏香是操作简单、消毒效果好并且经济实惠的有效途径之一。
1 材料与方法
1.1 试验时间
试验于2017年6月-8月展开。
1.2 材料
中草药熏香(天香)由广东天地本草饲料科技股份有限公司提供,其主要成分包括:艾草、苍术、五倍子、芡实、玉竹等10数种中草药。标准菌株:金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、沙门氏菌。M-H培养基购置于青岛高科园海博生物技术有限公司, 100 mm培养皿、0.45 μm、0.22 μm过滤器等均购置于广州佳妍生物有限公司。
1.3 菌液制备
在超净工作台中将金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌接种到LB琼脂培养基平板上,置于37 ℃恒温箱中培养12 h,挑取单克隆接种到无菌LB培养基中200 r/min,37 ℃摇菌6~8 h,然后用LB培养基配置成0.5麦氏比浊浓度(相当于1.5x108 cfu/mL细菌浓度),再稀释成1.0×106 cfu/mL的菌液作初筛和测定最小抑菌浓度(MIC)用,现配现用。
1.4 菌落计数法模拟现场杀菌作用
在超净工作台中用LB培养基将0.5麦氏比浊浓度的菌液(相当于1.5x108 cfu/mL细菌浓度)稀释105倍,吸取100 μL菌液均匀涂布在100 mm无菌M-H琼脂培养基上。在超净工作台中点燃中草药熏香,待产生均匀稳定的烟雾后,将涂布好的平板开盖倒扣在烟雾上方约30 cm处,分别停留0 min、1 min、5 min、10 min、30 min、60 min,结束后37 ℃培养12 h,每组重复3次,观察记录不同时间的菌斑数。
1.5 数据处理方法
用SPSS Statistics 19.0软件中的单因素方差分析进行数据统计分析,试验数据以平均数±标准误( ±SE)表示,P<0.05为差异显著,P<0.01为差异极显著。
2 试验结果
熏香经模拟现场杀菌试验测试,结果如表1、表2所示,经过10~30 min的烟熏,可以完全杀灭涂布在平板上的5种细菌。其中以对嗜水气单胞菌的效果最好,烟熏1 min的灭菌率为(29±1)%,烟熏5 min之后已能全部杀灭;其次为链球菌和大肠杆菌,烟熏10 min后平板上分别还有(6.33±4.10)cfu和(7.33±0.33)cfu,灭菌率分别为(94±4)%和(97±0)%。而对金黄色葡萄糖球菌和沙门氏菌则需要更长时间的烟熏才能达到杀菌作用。
表1 熏香对不同细菌模拟现场杀菌作用 cfu
停留时间/min | 大肠杆菌 | 沙门氏菌 | 链球菌 | 金黄色葡萄球菌 | 嗜水气单胞菌 |
0 | 222.33 A a±12.99 | 304.67 A a±4.67 | 100.67 A a±5.46 | 91.33 A a±8.41 | 84.00 A±5.51 |
1 | 215.33 A a±17.82 | 261.33 A b±18.49 | 74.00 B b±8.72 | 94.33 A a±10.17 | 59.67 B±4.91 |
5 | 13.67 B b±2.60 | 141.33 C±20.10 | 58.00 B c±5.51 | 33.00 B b±7.23 | 0.00 C±0.00 |
10 | 7.33 B b±0.33 | 56.00 D±8.08 | 6.33 D d±4.10 | 19.00 B b C c±4.51 | 0.00 C±0.00 |
30 | 0.00 B b±0.00 | 0.67 E e±0.33 | 0.00 D d±0.00 | 0.00 C c±0.00 | 0.00 C±0.00 |
60 | 0.00 B b±0.00 | 0.00 E e±0.00 | 0.00 D d±0.00 | 0.00 C c±0.00 | 0.00 C±0.00 |
表2 熏香对不同细菌模拟现场的杀菌率 %
停留时间/min | 大肠杆菌 | 沙门氏菌 | 链球菌 | 金黄色葡萄球菌 | 嗜水气单胞菌 |
1 | 3 A±4 | 14 A±5 | 25 A a±13 | -5 A±1.5 | 29 A±1 |
5 | 94 B c±1 | 53 B±7 | 42 A b±6 | 64 B b±9 | 100 B b±0 |
10 | 97 B b±0 | 82 C±3 | 94 B c±4 | 78 B b±6 | 100 B b±0 |
30 | 100 B b±0 | 100 D d±0 | 100 B c±0 | 100 B c±0 | 100 B b±0 |
60 | 100 B b±0 | 100 D d±0 | 100 B c±0 | 100 B c±0 | 100 B b±0 |
3 讨论
现代养殖场是疾病的重灾区和细菌污染源,疾病的防治是养殖场的重要环节。通过杀灭空气中病菌的方式是有效防治疾病的手段之一。
猪场内常用的杀菌方式化学消毒剂杀菌和物理方式杀菌,然而常规的化学消毒剂消毒均存在不同的毒性,对猪群和人员有一定的副作用,而物理杀菌方式主要是紫外灯杀菌,紫外杀菌易引起皮肤红斑、刺激眼结膜,并且紫外穿透力小,存在杀菌盲区,消毒不彻底。
中草药熏香源于野生植物,具有很高的安全性,燃烧产生烟气可以散发到整个空间,杀菌驱蚊彻底无死角,甚至在不关闭门窗时也能达到良好的效果,所产生的芳香性烟雾对皮肤、黏膜以及呼吸道无刺激,同时达到止咳平喘、预防流行性感冒、增强免疫力等功效。
4 结论
对五种细菌直接用薰香燃烟熏10~30 min后都可以达到很好的熏灭效果,尤其对嗜水气单胞菌、大肠杆菌、链球菌的熏灭效果最佳。